一,、儀器主要參數(shù)
流式細胞儀型號：艾森NovoCyte 2040R,，雙激光（488nm，640nm）, 488nm激光器配置3個檢測通道：FITC(530nm/30),、PE (572nm/28),、PerCp (675nm/30)；640nm激光器配置1個檢測通道：APC(675nm/30)。儀器最大樣品流速：120μL/min,。
二,、主要應(yīng)用：
用于定性、定量分析細胞膜,、細胞質(zhì)和細胞核中的各種細胞成分,；細胞的各種功能狀態(tài)，如增殖,、凋亡,、分化、酶活性,、細胞膜通透性,、氧化還原狀態(tài)、吞噬性等：
1,、細胞表面標(biāo)志檢測：細胞免疫表型分析,、表面蛋白分析等。
2,、細胞內(nèi)蛋白檢測：細胞因子,、細胞骨架分子和胞質(zhì)酶類等
3、細胞內(nèi)離子濃度檢測：H+,、Na+,、K+、Ca2+等,。
4,、細胞核成分檢測：細胞周期、DNA總量分析等,。
5,、細胞膜：流動性、膜電位,、膜通透性等,。
6、細胞功能：如細胞死活判定,、pH值,、增殖與凋亡、抗藥性等,。
7,、基因表達：內(nèi)源及外源基因表達，熒光報告基因的表達和轉(zhuǎn)染效率判定,。
三,、樣本制備
1,、待測樣品必須為單細胞懸液，測試前經(jīng)篩網(wǎng)或細胞濾膜過濾,。
2、保持樣品細胞活力,，尤其細胞表達蛋白（包括細胞內(nèi)和細胞表面）分析,，必須為新鮮制備的活細胞。
3,、正確設(shè)立對照,，包括陽性對照、陰性對照等,。
四,、使用流程
1、開機
輕按電源鍵啟動儀器,，電腦上打開NovoExpressTM,，待儀器初始化完成，待軟件狀態(tài)欄顯示“就緒”,。
2,、新建實驗
①點擊主菜單“文件”→“新建”新建實驗”；
②可用以下多種方式新建實驗樣本或標(biāo)本：
▲選擇“實驗管理”,，右鍵點擊“實驗文件名.ncf”,，在本實驗文件下新建標(biāo)本。右鍵點擊“標(biāo)本”,，在選中的標(biāo)本下新建樣本,。
▲如已有模板文件，點擊主菜單“文件”→“新建”→“從模板新建”,，將新建有相同模板的標(biāo)本或樣本,。
▲點擊主菜單“文件”→“保存”。
3,、樣品采集
①在“實驗管理”面板,，雙擊樣本，使之成為當(dāng)前樣本,；
②設(shè)置采集條件：樣本使用參數(shù),、停止條件、流速,；
③將樣本管充分混勻,，置于樣本架。
④點擊“采集”按鈕,。此時樣本針會向下運動至樣本管內(nèi),，吸取一定體積的樣本后收回,。注意：樣本管須放正，避免打針,！
4,、數(shù)據(jù)分析
①畫圖：根據(jù)需要選擇圖標(biāo)做圖，進行熒光通道參數(shù)選擇與修改,，圖片縮放,；
②設(shè)門：根據(jù)需要選擇門類型，雙擊門的標(biāo)簽可以對門進行重命名,；
③導(dǎo)出/導(dǎo)入模板
▲在“實驗管理”面板右鍵點擊標(biāo)本或樣本名稱,，選擇“導(dǎo)出”→“做為模板導(dǎo)出”或者“導(dǎo)入”→“導(dǎo)入模板”
▲在標(biāo)本或樣本名稱上按住鼠標(biāo)左鍵，拖動到另一個標(biāo)本或樣本名稱,，可直接實現(xiàn)模板應(yīng)用,。
④導(dǎo)出/導(dǎo)入FCS文件：
▲在“實驗管理”面板右鍵點擊實驗文件名稱、標(biāo)本或樣本,，選擇“導(dǎo)出FCS文件”,。
▲導(dǎo)入FSC文件：在“實驗管理”面板右鍵點擊實驗文件名稱、標(biāo)本或樣本,，選擇“導(dǎo)入FCS文件”,。
5、關(guān)機
平衡廢液,，待電源鍵為綠色,，即可輕按儀器前面板上的電源按鈕，儀器將自動執(zhí)行關(guān)機清洗流程,。關(guān)機流程結(jié)束后,，電源自動切斷，指示燈熄滅,，及時關(guān)閉電腦,。
注意事項：
1、實驗操作前須檢查鞘液,、廢液,、沖洗液和清洗液的水位；
2,、樣品上機前,，須提前過濾處理單細胞懸液（常用濾網(wǎng)：40μm、70μm,、100μm）,；
3、樣品管位置擺放正確,，避免樣本針被打彎,，推薦使用5 mL流式管上樣,；
4、拷貝數(shù)據(jù),，需提前將U盤格式化后再使用,。
5、若儀器出現(xiàn)任何故障,，及時聯(lián)系工作人員,。
