一,、主要應用：
Roche LightCycler480 II可進行絕對定量、相對定量,、基因分型（熔解曲線法及終點法）,、高分辨率融解曲線分析，同時適用幾乎所有檢測模式（染料檢測,、水解探針（TaqMan探針）,、雜交探針、簡單探針等）,；采用Therma-BaseTM熱循環(huán)專利技術和先進的光學檢測系統(tǒng),，徹底消除邊緣效應，保持穩(wěn)定優(yōu)異的檢測結(jié)果,；可同時檢測96孔板樣品,，結(jié)果通過PCR循環(huán)過程中實時熒光采集和軟件分析進行定量和基因型的分析。出色的光學檢測系統(tǒng)可以進行多重PCR檢測，并適用于多種檢測模式,，包括：
1,、非序列依賴的探針模式（SYBR Green I或其他飽和熒光染料）；
2,、序列特異的探針模式（Taqman水解探針模式,，雜交探針模式，簡單探針模式,，分子信標,，Scorpions等模式）；
3,、通過高分辨率熔解曲線分析（HRM）進行基因掃描突變檢測,，產(chǎn)物分型和SNP研究等。
二,、使用流程
1,、打開LightCycler480總電源，系統(tǒng)進入自檢,，自檢過程中切勿放置反應板,，自檢完畢后左側(cè)指示燈為綠色，右側(cè)指示燈為橙色,。
2,、按多孔板加載器按鈕，放置反應板,，此時兩個指示燈均顯示綠色,。
3、開啟計算機電源,，雙擊“LightCycler480 Software”圖標,，成功登陸后點擊“New Experiment”按鈕，進入“New Experiment/Run Protocol”程序設置界面,。
4,、設置實驗程序，依次為：按“Program Name”命名程序,，按“Cycles”設置循環(huán)數(shù),，按“Analysis Mode”選擇分析模式；在“Temperature Targets”界面設置所指定程序的內(nèi)容,，在“Target(℃)”處填寫目標溫度,；按“Acquisition Mode”選擇信號采集方式，按“Hold”設定持續(xù)時間,，按“Ramp Rate(℃/s)”設置升降溫速率,。若需增添步驟,，可點擊“+”，點擊上下箭頭調(diào)整各程序順序,。
5,、設置完畢后，單擊“Start Run”,，在跳出的對話框中命名并保存,。點擊“確認”，此時LightCycler480儀器上的兩個指示燈均為綠色閃動狀態(tài),。
6,、實驗運行完畢后，點擊界面左側(cè)的“Analysis”按鈕分析數(shù)據(jù),，“Create new analysis”窗口顯示分析方法,，“Open existing analysis”窗口顯示已分析結(jié)果。點擊“Calculate”生成結(jié)果,，點擊右側(cè)的保存,。
7、點擊左側(cè)工具欄中“Report”,，在“General”和“Detailed”兩欄中選擇實驗報告所要包含的內(nèi)容,；點擊右上方“PDF”按鈕將報告保存為*.pdf文件。
8,、儀器使用完畢后,，取出反應板，關閉LightCycler480儀器電源,，退出LightCycler480應用軟件,。
注意事項：
1、儀器自檢過程切勿放入反應板,；若自檢未通過，導致多孔板加載器故障不能收回,，請及時聯(lián)系工作人員,，切勿私自處理。
2,、必須使用儀器配套的96孔PCR板,。
3、儀器電腦開啟需密碼權(quán)限,，請于工作日（8:00-17:30）預約使用,。
3、參數(shù)設置注意檢查再運行,，特別是“Acquisition Mode”選擇信號采集方式一定要記得選擇,。
4、嚴禁在存放本機的實驗室內(nèi)揭開使用后的PCR板貼膜。
5,、實驗若需提前終止,，請點擊“End Program”鍵。
6,、拷貝數(shù)據(jù),，需提前將U盤格式化后再使用。
7,、儀器出現(xiàn)任何故障,，及時聯(lián)系工作人員。
