微衛(wèi)星位點廣泛存在于人類基因組中，微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）具有腫瘤特異性,，腫瘤細胞會因DNA錯配修復功能的缺失導致微衛(wèi)星不穩(wěn)定,。微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）是一個有近30年歷史的腫瘤標志物，可以用于輔助林奇綜合征診斷,，是結直腸癌,、胃癌的預后因子和術后5-FU化療療效的預測因子。近年來隨著免疫檢測點抑制劑應用的越來越廣泛,，尤其是帕博利珠單抗跨瘤種獲批治療MSI-H或者dMMR腫瘤后,，微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）作為各個實體瘤預后和制定輔助治療方案的重要分子標志物越來越受到關注。MSI-H型腫瘤每年新發(fā)病例可達30萬,，這意味著每年會有大量的MSI-H腫瘤患者可在免疫治療中獲益,，因此，準確診斷患者的MMR/MSI狀態(tài)十分關鍵,。
1,、目前檢測MMR/MSI的方法主要有三種，免疫組織化學染色法（IHC）,、PCR+毛細管電泳法和二代測序法,。其中PCR+毛細管電泳法是當前業(yè)界公認的金標準方法。IHC和PCR+毛細管電泳法在臨床使用較為廣泛,，且一致性較高,，但只使用IHC一種檢測手段有較大幾率造成MMR/MSI狀態(tài)的誤診。因此,，開展MSI-PCR+毛細管電泳法十分必要,，臨床醫(yī)師及患者可以根據(jù)不同的檢測需求，選擇最佳的MSI檢測方式。
2,、MSI-PCR+毛細管電泳法檢測位點的選擇非常重要,，目前國內《CSCO結直腸癌診療指南》（2020版）推薦的唯一檢測panal則是美國國家腫瘤研究所（NCI）公布的“2B3D”NCI Panel：包含BAT-25,BAT-26，D5S346,，D17S250,，D2S123。國內多中心研究提示“2B3D”Panel在中國人群中敏感性高于單核苷酸的Panel,。
3,、本科室開展的MSI-PCR+毛細管電泳法通過多重熒光PCR技術擴增同一患者的正常組織和腫瘤組織的微衛(wèi)星等位基因，借助毛細管電壓儀分析擴增后的基因圖譜,，判斷腫瘤組織的微衛(wèi)星狀態(tài),。擴增的六個微衛(wèi)星位點包括兩個單核苷酸重復單元位點（BAT-25,BAT-26）、三個雙核苷酸重復單元位點（D5S346,，D17S250,，D2S123）以及一個五核苷酸重復單元的內參位點（Penta C）。根據(jù)微衛(wèi)星位點不穩(wěn)定的數(shù)量分為微衛(wèi)星高度不穩(wěn)定型（MSI-H）,、微衛(wèi)星位點不穩(wěn)定型（MSI-L）和微衛(wèi)星穩(wěn)定型（MSS）三種微衛(wèi)星狀態(tài),。此方法在準確性，位點標準化,，檢測結果不存在異質性等方面具有極大優(yōu)勢,。
微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）在指導實體瘤的免疫治療上具有十分重要的臨床意義，準確的檢測MMR/MSI狀態(tài)至關重要,，建議聯(lián)合PCR+毛細管電泳法和IHC法以獲得準確可靠的MMR/MSI檢測結果,，使得更多腫瘤患者獲益。
